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Biologia molecular

BCR-ABL p210 PCR QUALITATIVO

Mnemônico: BA210
Material: Sangue Total (EDTA) ou Medula Óssea (EDTA).
Volume:
- 10,0 mL de sangue total em EDTA.
- 10,0 mL de medula óssea em EDTA.
Instruções:
- A coleta do material aspirado de medula óssea é um procedimento médico.
- Enviar Ficha de Solicitação de Exames Moleculares de Oncohematologia preenchida junto com a amostra.
Conservação:
- Sague total: refrigerado de 2°C a 8°C.
- Medula óssea: refrigerada de 2°C a 8°C.
- A amostra deve estar no laboratório em no máximo 48 horas após a coleta.
Critérios de Rejeição:
- Baixa celularidade;
- Uso de anticoagulante incorreto;
- Material congelado, coagulado ou severamente hemolisado;
- Amostras recebidas em frascos não estéreis ou com vazamento;
- Amostra com tempo superior a 24 horas após a coleta.

Método: RT-PCR.
Prazo de Liberação do Resultado (a partir da entrada do material no setor técnico): 10 dias.
Descrição: A Leucemia Mielóide Crônica (LMC) é a doença mieloproliferativa mais comum. A LMC caracteriza-se pela presença do cromossomo Philadelphia (Ph), que resulta da fusão de
parte do oncogene ABL no cromossomo 9 com o gene BCR no cromossomo 22. Esta fusão é
denominada translocação BCR/ABL ou translocação t(9;22). Esse exame detecta os transcritos de fusão que codificam a isoforma p210 da proteína. Embora o diagnóstico da LMC possa ser feito por análise citogenética, a detecção da translocação BCR/ABL por meio da Reação em Cadeia da Polimerase Reversa (RT-PCR) é considerada a técnica mais sensível para diagnóstico desta leucemia.

Formato do Resultado:
MÉTODO: RT-PCR (Metodologia In House).

RESULTADO:

VALOR DE REFERÊNCIA:
Negativo: Ausência do transcrito de fusão BCR-ABL isoforma p210.


INTERPRETAÇÃO:
A. Positivo: Presença do transcrito de fusão BCR-ABL isoforma p210.
B. Negativo: Ausência de transcrito de fusão BCR-ABL isoforma p210, na presença da amplificação do gene constitutivo (ABL);
C. As análises, controles e interpretações seguem as recomendações de van Dongen et al. Standardized RT-PCR analysis of fusion gene transcripts from chromosome aberrations in acute leukemia for detection of minimal residual disease. Report of the BIOMED-1 Concerted Action: investigation of minimal residual disease in acute leukemia. Leukemia 1999;13(12):1901-28.
D. A sensibilidade desta PCR e de 10-3/10-4.

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