Nome do Exame: PML-RARa t(15;17) PCR QUALITATIVO


Mnemônico: PMLRA


Material: Sangue Total (EDTA) ou Medula Óssea (EDTA).


Volume: 
– 4,0 mL de sangue total em EDTA.
– 4,0 mL de medula óssea em EDTA.


Instruções:
– A coleta do material aspirado de medula óssea é um procedimento médico;
– Enviar Ficha de Solicitação de Exames Moleculares de Oncohematologia preenchida junto com a amostra.


Conservação:
– Sague total: até 1 dia à temperatura ambiente ou refrigerado de 2°C a 8°C.
– Medula óssea: até 1 dia à temperatura ambiente ou refrigerada de 2°C a 8°C.
– A amostra deve estar no laboratório em no máximo 24 horas após a coleta.


Critérios de Rejeição:
– Baixa celularidade;
– Uso de anticoagulante incorreto;
– Material congelado, coagulado ou severamente hemolisado;
– Amostras recebidas em frascos não estéreis ou com vazamento;
– Amostra com tempo superior a 24 horas após a coleta.

Método: RT-PCR.


Prazo de Liberação do Resultado (a partir da entrada do material no setor técnico): 5 dias úteis.
Descrição: O gene PML é considerado um gene supressor de tumor implicado no controle da estabilidade genômica. Estudos com células em cultura sugerem que ele controla a indução de apoptose dependente de p53, supressão de crescimento e senescência celular em resposta à radiação ionizante e transformação oncogênica. A oncoproteína PML-RARα atua interrompendo o processo de diferenciação das células mieloides, bloqueando a maturação mieloide no estágio de promielócitos, o que pode ser um dos primeiros passos no processo de leucemogênese.

Aplicação clínica: 
a. Diagnóstico de Leucemia Mieloide Aguda (LMA) M3
b. Avaliação da resposta terapêutica (DRM) na LMA M3 PML-RARa.

Formato do Resultado:


MÉTODO: RT-PCR (Metodologia In House).

RESULTADO:

VALOR DE REFERÊNCIA:
Negativo para a translocação PML-RARa t(15;17).

INTERPRETAÇÃO:
A. Positivo: Presença de amplificação especifica para PML-RARa t(15;17);
B. Negativo: Ausência de amplificação especifica para PML-RARa t(15;17), na presença da amplificação do gene constitutivo (ABL);
C. As análises, controles e interpretações seguem as recomendações de van Dongen et al. Standardized RT-PCR analysis of fusion gene transcripts from chromosome aberrations in acute leukemia for detection of minimal residual disease. Report of the BIOMED-1 Concerted Action: investigation of minimal residual disease in acute leukemia. Leukemia 1999;13(12):1901-28.
D. A sensibilidade desta PCR e de 10-3/10-4.