Nome do Exame: MLL-AF4 t(4;11) – PCR QUALITATIVO.


Mnemônico: MLAF4


Material: Sangue Total (EDTA) ou Medula Óssea (EDTA).


Volume: 
– 4,0 mL de sangue total em EDTA.
– 4,0 mL de medula óssea em EDTA.


Instruções:
– A coleta do material aspirado de medula óssea é um procedimento médico.
– Enviar Ficha de Solicitação de Exames Moleculares de Oncohematologia preenchida junto com a amostra.


Conservação:
– Sague total: até 1 dia à temperatura ambiente ou refrigerado de 2°C a 8°C.
– Medula óssea: até 1 dia à temperatura ambiente ou refrigerada de 2°C a 8°C.
– A amostra deve estar no laboratório em no máximo 24 horas após a coleta.


Critérios de Rejeição:
– Baixa celularidade;
– Uso de anticoagulante incorreto;
– Material congelado, coagulado ou severamente hemolisado;
– Amostras recebidas em frascos não estéreis ou com vazamento;
– Amostra com tempo superior a 24 horas após a coleta.

Método: RT-PCR.


Prazo de Liberação do Resultado (a partir da entrada do material no setor técnico): 5 dias úteis.
Descrição: A translocação 11q23 resulta em rearranjo MLL-AF4. O gene MLL foi identificado em leucemias de linhagem mista ou leucemias bifenotípicas. O evento da transformação envolve a stem cell, ou a célula progenitora pluripotente, com capacidade para se diferenciar tanto na linhagem linfoide quanto na mieloide. O fenótipo é CD10(-), precursor de células-B, ou pré-B com co-expressão de antígenos mieloides, principalmente o CD15. Essa translocação ocorre em 60% das LLAs em lactentes menores de 1 ano, 2% em crianças e 3% a 6% em adultos.

 

Aplicação clínica:
– Diagnóstico de Leucemia Linfoide aguda (LLA) Pró-B;
– Diagnóstico e estratificação da leucemia aguda do lactente;
– Estratificação de risco alto na LLA pró-B.

Formato do Resultado:

MÉTODO: RT-PCR (Metodologia In House).

RESULTADO:

VALOR DE REFERÊNCIA:
Negativo para a translocação MLL-AF4 t(4;11).

INTERPRETAÇÃO:

A. Positivo: Presença de amplificação especifica para t(4;11) (MLL-AF4);
B. Negativo: Ausência de amplificação especifica para t(4;11) (MLL-AF4), na presença da amplificação do gene constitutivo (ABL);
C. As análises, controles e interpretações seguem as recomendações de van Dongen et al. Standardized RT-PCR analysis of fusion gene transcripts from chromosome aberrations in acute leukemia for detection of minimal residual disease. Report of the BIOMED-1 Concerted Action: investigation of minimal residual disease in acute leukemia. Leukemia 1999;13(12):1901-28.
D. A sensibilidade desta PCR e de 10-3/10-4.